Biocytogen 发表于 2015-7-8 16:44:19

基因组编辑技术的鬼斧神工

         自CRISPR/Cas9技术火爆之后,基因组的“任意编辑”实现了一步巨大的跨越,基因编辑技术也随之成为生命科学领域讨论的最多的话题之一。基因编辑技术是一种可以在基因组水平上对DNA序列进行改造的遗传操作技术,目前,最火爆应用最广泛的基因编辑技术当属CRISPR/Cas9技术。下面就给大家简单介绍一下这种基因编辑技术。
   CRISPR/Cas9这种基因编辑技术的原理是Cas9蛋白(含有两个核酸酶结构域,可以分别切割DNA两条单链)首先与sgRNA(single guide RNA)结合成复合物,然后通过PAM序列结合并侵入细胞靶序列DNA,形成RNA-DNA复合结构,进而对目的DNA双链进行切割,使DNA双链断裂。切断的DNA在被细胞内的DNA修复系统修复过程中会产生突变,从而达到定点改造基因组的目的。DNA修复系统主要通过两种途径修复断裂的双链DNA(double-strand break,DSB),即非同源末端连接(Nonhomologous end joining, NHEJ)和同源重组(homologous recombination, HR)。通过这两种方式,基因组编辑技术可以实现三种基因组改造的目的,即基因敲除、特异突变的引入和特定外源序列的引入即基因敲入。
1)基因敲除:如果想使某个基因的功能丧失,可以在这个基因上产生DSB,NHEJ修复的过程中往往会产生DNA的插入或删除(indel),造成移码突变,从而实现基因敲除。
2)特异突变引入:如果想把某个特异的突变引入到基因组上,需要通过同源重组来实现,这时候要提供一个含有特异突变的同源模版。
3)特定外源序列的引入:与特异突变引入的原理一样,在同源模版中间加入一个外源基因序列(基因敲入)或者一段特殊的DNA序列(如loxp,条件性敲除),这个外源序列在DSB修复过程中会被重组到基因组中,从而实现特定外源序列的引入。
近几年,基因编辑技术的应用在我国迅猛发展,百奥赛图作为最早的基因编辑技术服务供应商,可实现全基因敲除、条件性基因敲除、基因敲入及点突变等基因组改造目的,其独有的4S保障体系(Specialty-专业设计方案,Special-独特技术体系,Strict-严格质控标准,Standard-标准操作流程),不仅保障质量还保证最快拿到模式鼠的世界速度。

wyzandrea 发表于 2015-11-11 15:09:34

谢谢你的分享,我也才发表过一篇文章叫:What Is the CRISPR/Cas9 Technology?
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