科研CRO 发表于 2021-7-30 09:11:35

Masson三色染色法-北京百奥思科生物分享

Masson三色染色法是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维,又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

Masson三色染色法步骤

切片常规脱蜡至水;

用配制好的Weigert 铁苏木素染色液染色5 min-10 min;

充分水洗,如过染可盐酸酒精分化;

Masson蓝化液返蓝3-5 min,水洗;

蒸馏水洗1 min;

丽春红品红染色液染色5-10 min;

在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液,用弱酸工作液洗1 min;

1%磷钼酸溶液洗1-2 min;

用配置好的弱酸工作液洗1 min;

不经水洗直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2 min;

用配置好的弱酸工作液洗1 min;

95%乙醇快速脱水;

无水乙醇脱水3次,每次5-10 s;

二甲苯透明3次,每次1-2 min;

中性树胶封固。

Masson三色染色法结果

Masson 染色后肌纤维、胞浆、肌肉呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,胞核呈黑蓝色


注意事项

切片脱蜡应尽量干净。

组织固定起着非常重要的作用,使用不同的固定液可延长或缩短染色时间。

酸性乙醇分化时间应该依据切片薄厚,组织的类别和新旧而定。

弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳,如使用量大可自行配置 0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。

磷钼酸分化时要在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定,一般1-2min。
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