如何用高效液相色谱法测定复方元胡止痛片中丹皮酚的含量
如何用高效液相色谱法测定复方元胡止痛片中丹皮酚的含量 中国药业人才网：复方元胡止痛片收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂》(第7册),它的主要功能疏气止痛,用于肝胃气痛、胃脘胀痛、胸肋痛、月经痛。处方由延胡索(醋制)、徐长卿、香附(醋制)、川楝子组成[1]。原标准中只有鉴别项检查,没有含量控制项。为了更好地控制复方元胡止痛片的质量,我们对复方元胡止痛片处方进行了分析,发现延胡索、徐长卿在整个处方中作用最大。复方元胡止痛片中延胡索的含量测定多有报道,而对徐长卿进行研究的较少。徐长卿中有效药理活性成分为丹皮酚,故我们以徐长卿中丹皮酚的含量为指标,采用高效液相色谱(HPLC)法测定丹皮酚含量,为复方元胡止痛片中丹皮酚的定量分析提供有效方法。药学博士论文 仪器与试药 高效液相色谱仪：SPD-10A日本岛津；紫外分光仪：上海康化生化仪器制造厂；超声波清洗器：SK3200H上海科导超声仪器有限公司。丹皮酚对照品(批号0708-9704,供含量测定用),中国药品生物制品检定所提供；复方元胡止痛片(批号20050201、20050202、20050203),河南百年康鑫药业有限公司提供。其他试剂均为分析纯。 方法与结果 2.1 色谱条件 Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水(1∶1),流速1.0 mL/min；检测波长274 nm；分离度大于1.5,理论塔板数按丹皮酚峰计不少于2 000。色谱图见图1。 2.2 溶液的制备 2.2.1 对照品溶液的制备 取丹皮酚对照品适量,用甲醇溶解,制成每1 mL含丹皮酚40 μg的溶液。 2.2.2 供试品溶液的制备 取供试品10片,精密称定,研细,取约0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入25 mL甲醇,称定重量,超声处理(功率135 W,频率59 kHz)30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。药学博士论文 2.2.3 阴性对照品溶液的制备 依据处方中的比例,按制法制备缺徐长卿的阴性对照样品,按供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。 2.3 线性关系的考察 精密称取丹皮酚适量,用甲醇溶解,制成每1 mL含丹皮酚40 μg的溶液。分别进样2.5、5.0、10.0、15.0、20.0 μL,测定峰面积,以峰面积积分值为纵坐标、丹皮酚的进样量为横坐标绘制标准曲线,计算,得回归方程：Y＝5 043.774 9X＋275.591 5,r＝0.999 7(n＝5),表明丹皮酚在0.103～0.824 μg之间呈良好的线性关系。药学博士论文 2.4 精密度试验 取同一批号供试品(批号20050201)研细,称取0.5 g,按照供试品溶液制备方法制得供试品溶液,进样量10 μL,连续进样6次,记录峰面积,结果RSD＝0.32%,表明精密度良好。 2.5 重复性试验 取同一供试品(批号20050201),按照上述色谱条件,连续测定5次,测定每份样品中丹皮酚含量,结果RSD＝1.56%,表明重复性良好。 2.6 稳定性试验 取同一供试品溶液(批号20050201),分别在0、2、4、6、8 h测定,并计算丹皮酚含量,RSD＝0.48%(n＝5)。表明制备的供试品溶液在8 h内稳定。 2.7 加样回收率试验 精密称取已知含量的同一批号供试品(批号20050201)6份,取样量为0.25 g,精密称定,分别加入适量丹皮酚(约0.5 mg),按照供试品溶液制备方法制备供试品溶液,进样量10 μL,测定丹皮酚含量(结果见表1),平均回收率为98.59%,RSD＝0.68%(n＝6)。表1 加样回收率试验结果（略） 2.8 样品测定药学博士论文
按照供试品溶液制备方法对3批中试产品进行测定,测定结果见表2。表2 样品中丹皮酚含量测定结果（略） 讨论 根据3批测定结果,徐长卿含量(以丹皮酚计)每片不低于0.60 mg,由于各地徐长卿药材的差别较大,因此,暂拟定复方元胡止痛片中徐长卿含量每片(以丹皮酚计)不低于0.50 mg。结果表明,本试验方法简便、快速、准确,各批次含量较稳定,适用于本产品的质量控制,可作为该制剂中丹皮酚含量测定方法。 中国药业人才网——医药行业人力资源专家！！！ 如何用高效液相色谱法测定复方元胡止痛片中丹皮酚的含量
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