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siRNA转染后什么时候做qRT-PCR检测最好?

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engreen 发表于 2016-8-24 16:31:58 | 显示全部楼层 |阅读模式
1.siRNA转染后什么时候做qRT-PCR检测最好?

siRNA的沉默效果是有时效性的,在最佳的时间点观察,会得到更加明显的沉默效果,这个时间点的确定不能以同一株细胞转染DNA的经验确定,因为一个是消耗mRNA,一个是产生mRNA。对转染siRNA,在核酸水平,转染后8-48小时,即可观察到mRNA水平的逐步下降,一般来说,转染后48小时进行qRT-PCR检测通常会得到漂亮的结果。

2.siRNA转染后什么时候做蛋白检测(如Western Blot)最好?

在mRNA水平下降后,接下来才会有蛋白水平的下降,一般来说,转染后48-72小时进行蛋白检测通常会得到较好的结果

EntransterTM-R4000是英格恩生物(Engreen Biosystem)最新研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。EntransterTM-R4000不仅可以转染小RNA,而且针对mRNA等长链RNA优化。由于纳米技术的应用,EntransterTM-R4000能做到高达90%的转染效率和60-90%的沉默效率,对难转染细胞和原代细胞也非常适用。

适用范围

    小RNA转染。包括siRNA转染,miRNA,mimic,inhibitor等。
    长链的mRNA和shRNA转染,针对mRNA和长链的shRNA等RNA转染优化。
    可转染动物细胞、昆虫细胞等,也可以转染原代细胞、悬浮细胞和原代细胞等传统难转染细胞。


主要特点

    最新转染试剂,纳米聚合物,转染效果优于脂质体转染试剂
    高效转染,沉默效率高,可以达到90%以上的沉默效率
    低细胞毒性,有血清转染,无须反复更换培养基
    原代细胞、悬浮细胞和敏感细胞都能转



文章来源:英格恩技术的官方博客,原文详见: http://www.engreen.cn/2015/05/sirna转染后什么时候做qrt-pcr检测最好?


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