Masson三色染色法-北京百奥思科生物分享
Masson三色染色法是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维,又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。Masson三色染色法步骤
切片常规脱蜡至水;
用配制好的Weigert 铁苏木素染色液染色5 min-10 min;
充分水洗,如过染可盐酸酒精分化;
Masson蓝化液返蓝3-5 min,水洗;
蒸馏水洗1 min;
丽春红品红染色液染色5-10 min;
在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液,用弱酸工作液洗1 min;
1%磷钼酸溶液洗1-2 min;
用配置好的弱酸工作液洗1 min;
不经水洗直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2 min;
用配置好的弱酸工作液洗1 min;
95%乙醇快速脱水;
无水乙醇脱水3次,每次5-10 s;
二甲苯透明3次,每次1-2 min;
中性树胶封固。
Masson三色染色法结果
Masson 染色后肌纤维、胞浆、肌肉呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,胞核呈黑蓝色
注意事项
切片脱蜡应尽量干净。
组织固定起着非常重要的作用,使用不同的固定液可延长或缩短染色时间。
酸性乙醇分化时间应该依据切片薄厚,组织的类别和新旧而定。
弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳,如使用量大可自行配置 0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。
磷钼酸分化时要在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定,一般1-2min。
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