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大傻瓜 发表于 2004-5-31 21:33:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
本人做全细胞膜钳,发现细胞膜破之后很容易融合,不知那位高手指点一下,还有记录的钙离子流怎样才能维持稳定呢?请指点。谢谢
dairiver 发表于 2005-9-21 10:19:00 | 显示全部楼层
是的,电极电阻越大越容易封接,但破膜不容易,反之亦然。我的体会是以较大的电阻电极封接后,使用zip击穿细胞膜,效果还行。
dairiver 发表于 2005-9-21 10:26:00 | 显示全部楼层
刚才忘说了,钙通道易发生rundown,这主要和细胞状态有关,应该着重提高分离技术。另外,电极液中的葡萄糖和ATP盐有助于细胞的稳定,而且电极液使用时应置于冰块上,保持低温。
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bioguider 发表于 2004-5-31 22:29:00 | 显示全部楼层
你是指RESEAL吧,你可以把细胞电极尖端再拉粗些,3微米左右比较好,阻抗一般在5M左右.
 楼主| 大傻瓜 发表于 2004-6-1 23:46:00 | 显示全部楼层
3微米是不是太粗了?我现在用的最多1。5个微米,不过可以试试。谢谢
dairiver 发表于 2005-9-19 20:31:00 | 显示全部楼层
可以在破膜后维持小的负压。另外文献都讲电极尖端一般2-5兆欧,但我体会电阻稍大一点的全细胞模式更稳定,比如7-8兆欧。
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fanping 发表于 2005-9-20 11:05:00 | 显示全部楼层

可也有文献报道,电极阻抗较小封接较容易的,其实还是要看自己做实验的状况和细胞类型了。

nanalala 发表于 2005-9-25 00:46:00 | 显示全部楼层
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