[求助]关于膜片钳实验的几个问题

1.电极尖端总是吸附杂质和死亡细胞，怎么解决？

2.细胞复钙后死亡率很高，文献上提示逐步复钙，请问具体方法，浓度和时间是什么？

3.电极入液后，给予一定的正压，以防止尖端阻塞，正压一般是多少？而给予负压封接，一般又是多少？

谢谢！

[系统提示]:
  .::本帖子因为[奖励]值得推荐的原创文章被神经科学论坛管理员a2s2d3实行了：+5金钱 的奖惩::.

1. 一般电极在入水前是要给正压的,这个目的主要就是为了不让杂质吸附.还有,溶液用之前要过滤.

2. 这不太清楚.

3. 我们都是直接用嘴给压,也有就是10ML注射器给一ML的压力.

[系统提示]:
  .::本帖子因为[奖励]解决了楼主提出的问题被神经科学论坛管理员a2s2d3实行了：+10金钱 的奖惩::.

3. 我们都是直接用嘴给压,也有就是10ML注射器给一ML的压力.

这个1ML是正压还是负压？缓慢给，是么？

当然是正压了，可以慢慢的给，这没有什么影响，我通常是给0.5ml.

做脑片的话我给0.2ml正压, 做急性分离或培养细胞我给0.1ml, 好像已经够了。

我认为你在记录前首先应该将细胞培养液换成过滤好的细胞外液，这样就应该没有死细胞等吸附电极了。