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稳定细胞系筛选——研究基因功能的首选手段

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王久明 发表于 2012-9-5 13:58:48 | 显示全部楼层 |阅读模式
本帖最后由 王久明 于 2012-9-21 11:34 编辑

众所周知,基因通过复制把遗传信息传递给下一代,并通过控制酶的合成来控制代谢过程,从而控制生物的个体性状表现。研究基因的功能就在这个领域有着举足轻重的作用。
研究某个基因的功能要么是通过一定的方法把这个基因过表达,要么是扣除这个基因,专业说法就是RNA干扰knock-down该基因。那么如何使之过表达或knock-down呢?其中一般首选的方法就是筛选稳定细胞系,因为一旦有了稳定细胞系,后期进行的Co-IP或者Pull-Down实验会非常便利,并且稳定表达重组荧光蛋白的细胞系可以观察分子在细胞中的运动。
可以通过单克隆方法、慢病毒感染这两种方法筛选稳定细胞系,一般实验室是通过慢病毒感染筛选稳定细胞系技术来完成实验研究。长三角地区这个技术做的相对成熟,尤其像上海的一些科学研究院,七海复泰生物,上海英骏生物等单位。其中研究院以探索发展吸引着各实验室的目光;七海复泰生物就以其丰富的基因库资源,所用载体为哈佛医学院、麻省理工学院等机构的知名实验室构建而闻名。
对于基因研究相信还会有更大的突破,让我们拭目以待。

wzyhbfd 发表于 2013-8-21 20:44:12 | 显示全部楼层
研究基因的功能还可以通过Knock out 的方式,让原有的基因不表达来实验功能的验证。利用现有的TALEN或者CRISPR/cas9技术可以很方便的构建可稳定遗传的基因敲除细胞系,这些技术已经为众多实验室所采用。像北京唯尚立德生物科技有限公司(www.v-solid.com)就能提供稳定敲除、敲入细胞系的构建服务.
gothaveu 发表于 2013-11-23 14:26:38 | 显示全部楼层
基因的研究现在很频繁,但是效果并不明显。学术界反而更认可代谢修复
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