HDAC抑制剂Belinostat的研究进展

一、        HDAC简介
        组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)是一类蛋白酶,对染色体的结构修饰和基因表达调控发挥着重要的作用。一般情况下,组蛋白的乙酰化有利于DNA与组蛋白八聚体的解离，核小体结构松弛，从而使各种转录因子和协同转录因子能与DNA结合位点特异性结合，激活基因的转录。在细胞核内，组蛋白乙酰化与组蛋白去乙酰化过程处于动态平衡，并由组蛋白乙酰化转移酶（histone acetyltransferase, HAT）和组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase, HDAC）共同调控。HAT将乙酰辅酶A的乙酰基转移到组蛋白氨基末端特定的赖氨酸残基上，HDAC使组蛋白去乙酰化，与带负电荷的DNA紧密结合，染色质致密卷曲，基因的转录受到抑制。

二、        信号通路图

HDAC通路

三、        抑制剂Belinostat
        生理活性研究：Belinostat按10mg/kg剂量处理A2780和A2780/cp70 移植瘤，明显延迟肿瘤生长，但是对动物体重没有影响。 在鼠膀胱细胞中，Belinostat也诱导p21WAF1, HDAC 核心和细胞通讯基因。 Belinostat按100mg/kg剂量单独处理A2780移植瘤，产生抗癌功效，肿瘤抑制率（TGI）达47% ，这种抑制存在剂量依赖性。100 mg/kg Belinostat和40 mg/kg Carboplatin联用可以延迟肿瘤生长，从18.6 天到22.5 天。  Bortezomib和Belinostat联用，明显抑制肿瘤，此外，作用于携带抗Bortezomib UMSCC-11A移植瘤的鼠显示肠胃毒性 。

        细胞实验：肿瘤细胞系(A2780, A2780/cp70, 2780AD, HCT116, HT29, WIL, CALU-3, MCF7, PC3，和HS852) 按8×104个细胞/25 cm2 瓶接种在5 mL 培养基中，温育48小时。用Belinostat (0.016 到 10 μm)处理细胞24小时。1 mL 胰蛋白酶/EDTA加到培养瓶中。细胞分离后，加入1 mL培养基，细胞再次悬浮。稀释细胞，按0.5-2×103个细胞/皿移到6cm Petri皿中。37oC下温育10到15天。用PBS冲洗细胞，溶于甲醇，用结晶紫染色，计数大于50个细胞的群落。通过IC50值计算敏感度。