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[转贴]雪旺氏细胞

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sun125001 发表于 2006-3-4 19:35:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
引子:神经生物学的知识体系庞杂而且深奥,常常跨多个学科,现在抽时间把一些基础或是经典的神经生物学问题在全园子里检索整理一下,希望对各位站友有用。以后有经典的关于雪旺式细胞的讨论,我也会努力也整理到其中,让大家检索到我这个整理帖之后就不用再重新筛选,节约出时间发发NATURE,陪陪家人,旅旅游,美美容,抗抗 日…呵呵。

俗话说巧妇难为无米之炊,首先——米呢?

雪旺细胞的培养:参见
雪旺细胞培养经验
雪旺细胞培养纯化的问题(有差速贴壁英文流程)
雪旺细胞的培养方法哪种更佳
雪旺细胞培养胶原酶用几型
成年大鼠雪旺细胞的快速扩增.pdf(网上搜到的一片文献)

按照上述经验自己操刀之后也不知道模仿的效果如何,那到这里看看雪旺MM的照片,瞧瞧人家到底长啥样儿吧:Embaressed
诱导骨髓基质细胞分化为雪旺细胞(有图片)
大鼠雪旺细胞图片

可别把雪旺MM认错了呦,抱错新娘…会有N种死法的…Smile
镜下区分雪旺式细胞和成纤维母细胞的方法(有关于雪旺式细胞形态的描述和一些照片供参考)

新手上路往往会遇到些许挫折,这时候不妨看看别人是怎么分析问题度过难关的,参见:
培养雪旺细胞失败的原因

终于能够纯熟的得到雪旺式细胞了,面对下一步,我们第一个能想到的就是…做组化…
雪旺细胞的标记物(原帖题为“【方法】神经系统各种类型细胞的标志物”)

谁说免疫组化是人就能做明白?…有人提问了:
如何用免疫组化标记物在镜下区分雪旺细胞/少突胶质细胞

有站友在实验之余著书立说,参看:
综述一篇---雪旺细胞与脊髓再生

再补充一段经前人整理过并以word形式发过的一些问题,摘出与雪旺细胞相关的文字如下……(翻箱倒柜找出来容易么我,先给加500大分再说,呵呵)
【zhclive问】
我在取背根节做雪旺细胞培养时,有大量的成纤维细胞,传代后成纤维细胞更多,请教各位大虾有没有好的纯化雪旺细胞的方法?

【答】
by schwann
雪旺细胞的纯化,文献有很多报道了,不过都是80年代的了,不过最近也没有什么新方法。
消化法:由Brockes(1979)[34]提出,Wrathall等[35]又作了一些改进。基本步骤是:将鼠坐骨神经剪碎,置于0.25%胰酶和0.03%胶原酶中消化离心,培养。为了增加雪旺细胞的分裂速度和抑制成纤维细胞分裂,应用牛垂体浸出物(BPE)来刺激雪旺细胞的分裂和在培养24-48小时后,应用Ara-c抑制和破坏成纤维细胞,然后再用Thy-1.1,1.2抗血清加兔补体来溶解成纤维细胞。最后得到雪旺细胞的纯度可达99.5%。
植块法:由Askanas[36]报道,步骤如下:取鼠坐骨神经去除神经外膜,切成1cm3的小块,贴附于培养皿中,等待植块四周长出细胞后,将植块切除,再移植到新的培养皿上,使植块四周在长出应细胞后,再移植到新的培养皿上,直到获得大量的雪旺细胞,最后去除植块。该方法可以得到几乎纯净的雪旺细胞,因为通过反复移出植块,可去除大部分的成纤维细胞。优点是:通过反复移出,可明显减少非雪旺细胞数目,而不用细胞毒药物。
差速贴壁法:由Kreider和Pleasure等[37]报道。该方法主要是利宥嗑劾蛋彼幔?猿上宋?赴?掣搅?锨浚?匝┩?赴?掣搅?先踉?恚???上宋?赴?掣降讲F?希???蟹钦掣窖┩?赴?纳锨迨占?⒗胄摹⑴嘌?S诺悖核俣瓤欤谎┩?赴??扛撸徊挥每褂兴糠至岩┪锟寡?搴筒固濉S捎诟梅椒ㄊ窃诜掷牖竦孟赴?耐?保?腿コ?顺上宋?赴??虼似渌俣让飨钥煊谄渌?椒ǎ?钡闶浅上宋?赴??拷细哂谄渌?椒ā?


angele8866 发表于 2006-3-16 10:50:00 | 显示全部楼层
Thank you very much!
wuhanping 发表于 2006-3-18 10:53:00 | 显示全部楼层
wanhan_2003 发表于 2006-3-24 23:38:00 | 显示全部楼层
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