[求助]鸡胚电转质粒不表达

yeah · 发表于 2006-5-25 11:46:00

CMV-GFP的浓度从0.2--1 都用过

电压 20-30 V 50ms * 4-5

注射入神经管和hindbrain,

做完后存活,但没表达出

请教各位可能原因

PS:我用的是 BTX的电穿孔与细胞融合仪,电极到是自己做的 (5mm)

[此贴子已经被作者于2006-5-25 11:51:08编辑过]

bioguider · 发表于 2006-5-25 12:14:00

先做个能表达的对照，看操作方法是不是有问题。如果没问题，那就是质粒本身的原因。改进下PROMOTOR.

yeah · 发表于 2006-5-25 21:50:00

你的意思是说把它搞到酵母这些里?

CMV驱动应该没什么问题吧.

bioguider · 发表于 2006-5-26 09:29:00

promotor很重要的。有些是不能IN VIVO表达。

yeah · 发表于 2006-5-26 21:32:00

不过我用的是他们做tumor 细胞的

他们保存的是可以表达啊

bioguider · 发表于 2006-5-26 21:47:00

是不同的。普通转染没问题，但不能保证电转染也行。

yeah · 发表于 2006-5-26 23:30:00

哦哦?

可以讲下区别么,不是都导入到soma里就可以了?

谢谢啊

bio-sun · 发表于 2007-4-11 21:35:00

活体电转化不同于细胞的电转化，更不同于其他方法的转化，电压设置很重要，不同阶段的胚胎对电压的不同，或高或低都不能达到好的转化效果，而且仪器的电压稳定不稳定直接影响转化的效果，这也是活体组织不同于细胞转化的区别之一，也是很重要的一点。

选择的仪器也很重要

现在专业的活体电转化仪器是CUY21

chitosan · 发表于 2008-3-29 10:20:00

哪个实验室的，在国内做鸡胚的人不多。

glia · 发表于 2008-5-26 06:42:00

很想知道是哪个实验室的

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