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苗劲崴 发表于 2004-3-10 13:27:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
转基因动物(transgenic animal)
转基因动物是指通过实验室的某些方法,将人为构建的外源目的基因导入动物的生殖细胞或早期胚胎(原核或受精卵),使其稳定地整合到动物基因组中,并能遗传给后代的动物。1997年2月,第一头无性繁殖的克隆羊“多利”现世,标志着克隆哺乳动物的成功,更有利于转基因动物的培育和利用。最早的转基因动物是鸡,其后是利用注射法和病毒感染法转基因鼠。
生产转基因动物的技术关键,主要是对外源基因分离、重组、载体构建,受体(早期受精卵)基因导入外源基因胚胎的培养、移植,以及获得新生动物的整合和表达的鉴定技术等。在研究心血管疾病时,主要运用显微注射法、基因打靶或基因剔除等方法制备各种TGM模型。
1.显微注射法
Gordon等人首次成功地将含有HSV和SV40DNA片段的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内,得到了带有这种外源DNA顺序的TGM。
1982年Palmiter等运用此法得到的所谓“超级巨鼠”(supermouse)曾引起整个生物学界的轰动。这一方法外源DNA整合率高、容量大,DNA长到50kb仍然有效,实验周期缩短,因而应用较广泛,是制备TGM的一种常用方法。
这一方法的实验程序如下:
⑴准备假孕母鼠(养母):将可育雌鼠与输精管结扎后绝育的雄鼠交配,剌激雌鼠发生一系列妊娠变化而得到假孕母鼠作为受精卵转基因后的养母;
⑵受精卵的准备:可育雌鼠注射孕马血清与绒毛膜促性腺激素(HCG)促使超排卵。处理后与可育雄鼠交配。次日从输卵管内收集受精卵备用;
⑶基因导入:用显微注射装置将目的基因溶液导入受精卵雄性原核内;
⑷胚胎移植:将已转入基因的受精卵自背部植入假孕母鼠的输卵管内,使胚胎在养母体内发育成熟;
⑸对幼鼠的鉴定:
①幼鼠发生断乳后自尾部提取DNA,与目的基因探针作分子杂交,鉴定外源基因是否整合,有整合的鼠称为首建鼠(founder);②建立鼠系,将带有外源基因的小鼠与未经转基因的小鼠交配、传代后,后代有50%机率带有整合的基因供实验用。也可将合适的组织进行细胞培养建立细胞系;③自小鼠内脏提取RNA,与目的基因探针做分子杂交,比鉴定外源基因的表达和表达的组织特异性。
世界上第一只转基因动物巨鼠,是将大白鼠生长激素导入小白鼠的受精卵中,再将这个受精卵移入借腹怀胎的母鼠子宫中,产下的小白鼠比一般的大一倍。这只在遗传学上具有重大意义的转基因动物的研究培育成功,展现出诱人的光明前景。
  将外源基因导入家畜,能使家畜朝人类希望的目标靠拢,如肉质改善、饲料增效、个体增大、体重增加、奶量提高、脂肪减少等。用基因转移技术,增强动物抗病力的研究,也很鼓舞人心。
   而且转基因动物的乳汁可以用来生产蛋白质、造药,是全新的生产模式。与细菌、细胞等生物工程制药相比,它有明显优势:转基因动物的乳汁,可以方便收集,且不损伤动物;目的蛋白质,已经过动物体内加工和修饰,不必再进行后加工。而以往微生物、细胞等生物工程基因产物,要有后加工。用转基因动物生产,也不需投入大量资金建厂、添设施、雇用人员等。
  转基因动物还将是人类最好的“器官库”。
remind_me 发表于 2004-4-2 15:02:00 | 显示全部楼层
迟早人的基因也被改掉
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