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基因合成是指在体外合成双链DNA分子的一门技术,与寡核苷酸合成有所不同,寡核苷酸是单链的,所能合成的最长片段仅为100nt左右,而基因合成则为双链DNA分子合成,所能合成的长度范围50bp-12 kb。
A 已知序列的全基因的合成:
用RACE结合RT-PCR方法克隆已知序列的cDNA(全长),该方法比建立cDNA文库筛选cDNA的方法简便,由于直接从mRNA逆转录得到 的cDNA扩增目的cDNA片段,避免了将cDNA克隆到载体,包装并转染细菌几个步骤引起的低丰度cDNA丢失,因此克隆得到的目的cDNA的可能性高 于建立cDNA文库克隆目的cDNA的方法。该方法的第二个优点是得到的cDNA是含有完整5’端非翻译区的完整cDNA。
B.未知序列的全基因的合成:
RACE结合RT-PCR方法克隆未知序列基因的cDNA(全长)。根据已有的部分氨基酸序列,得到完整的cDNA序列。首先对其它物种该基因编码 的氨基酸序列进行比较,找出保守区域;然后根据保守的氨基酸序列设计RACE用的3’简并引物,再用该引物进行RACE,得到5’端序列以后,用RT- PCR的方法扩增得到完整的cDNA片段。
MDL公司拥有成熟的基因合成技术和工作经验。可根据客户需求提供全基因合成服务,包括 PCR ,连接,克隆和全长序列测定等。合成的基因可以根据客户的需求连接到不同的载体上,最终提供的产品包括冻存的菌种以及冻干的质粒。
一、 基因合成的应用:
二、基因合成的服务特色:
您只需要给我们提供您所需要合成的DNA序列,我们就会给您100%准确地合成
北京百奥思科生物医学技术有限公司
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