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最新发表的日志| 推荐阅读的日志

分享免疫荧光（IF）: baiaosike 2016-4-27 16:57; Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantibodytechnique）。　用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧 ...; 618 次阅读|0 个评论

分享 TUNEL检测: baiaosike 2016-4-27 16:55; 细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (flu ...; 609 次阅读|0 个评论

分享免疫组化: baiaosike 2016-4-27 16:53; 是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry) ...; 507 次阅读|0 个评论

分享细胞培养: baiaosike 2016-4-27 16:50; 细胞培养细胞培养技术也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养，既包括微生物细胞的培养，细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单 ...; 513 次阅读|0 个评论

分享 MTT检测: baiaosike 2016-4-27 16:43; MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反 ...; 475 次阅读|0 个评论

分享细菌16S rDNA菌种鉴定: baiaosike 2016-4-27 16:36; 16S rDAN是编码原核生物核糖体小亚基rRNA（16S rRNA）的基因。长度约为1500pb，是细菌分类学研究中最常用、最有用的"分子钟16S rRNA其大小在1,500 bp左右，所代表的信息量适中，因此是进行分类研究的理想材料。利用16S rDNA两端的引物PCR扩增未知菌株的16S rRNA基因，并进行DNA测序，与GenBank中的已知序列进行同源性比较 ...; 771 次阅读|0 个评论

分享基因甲基化检测: baiaosike 2016-4-27 16:29; 甲基化是在DNA甲基转移酶（DNA Methyltransferase, DNMT）催化作用下, 利用S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosylmethionine, SAM）提供甲基，在CpG二核苷酸中胞嘧啶嘧啶环的五号碳原子上加上甲基的共价修饰过程。DNA甲基化修饰现象广泛存在于多种有机体中，是最早发现的修饰途径之一，是表观遗传学（Epigenetics）的 ...; 478 次阅读|0 个评论

分享抑制性消减杂交（SSH）服务: baiaosike 2016-4-27 16:18; 差减文库也称扣除文库，使用两种遗传背景相同或大致相同但在个别功能或特性上不同的材料(如不同基因处理细胞系或植物的近等基因系等)提取mRNA(或反转录后合成cDNA)，在一定条件下用大大过量不含目的基因的一方作为驱动子(Driver)与含有目的基因的试 ...; 467 次阅读|0 个评论

分享酵母双（单）杂交cDNA文库构建: baiaosike 2016-4-27 16:17; 1. 服务流程 1.1 客户样品QC 1.2 Total RNA的提取。 1.3 mRNA的分离。 1.4 以mRNA为模板进行cDNA双链的合成。 1.5 对合成的cDNA双链进行分级纯化。 1.6 将分级纯化的cDNA与pDONR222载体进行重组反应。 1.7 将重组产物转化DH10B感受态细胞。 1.8 cDNA文库的QC。 a) 检测文库库容量。 b)随机挑取32个克隆子，PCR ...; 491 次阅读|0 个评论

分享 cDNA文库构建/EST测序分析: baiaosike 2016-4-27 16:09; 自20世纪70年代中期首例cDNA克隆问世以来，构建cDNA文库已成为研究功能基因组学的基本手段之一。由于cDNA不像基因组DNA含有内含子而难于表达，因此可以从cDNA文库中筛选到所需的目的基因，并直接用于该目的基因的表达。通过构建cDNA表达文库，可以提供构建分子标记连锁图谱的所用探针；可以用于分离全长基因进而开 ...; 538 次阅读|0 个评论

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