实验室无菌操作的技巧

污染是很多生物实验室中细胞培养, 细菌培养的噩梦,本人从事培养多年, 有些体会, 跟大家分享.

其实在接种过程中, 很多规则,都是常识,例如紫外杀菌,接种前洗手,等等,不再这里重复. 但是有一些小细节, 却可能是大家忽略的,但是往往恰恰是污染的原因, :

1. 首先,最重要的, 接种室灭菌, 一定不要省. 再高效的超净台也未必保证完全超净. 而且当我们操作的时候,手要伸进超净台,可能把菌就带进去啦. 如果接种室消毒了,就大大减少了这种机会.其实做法很简单,就是用灭菌水(没有灭菌水用70%酒精)喷到空气中, 密集的细小液珠粘着菌落到地上,空气就干净了.最极端的例子是我们实验室曾经超净台坏了,空气灭菌后在空气里直接接种昆虫细胞(没有任何抗生素), 都没污染.

2. 操作一定要快. 可能整个超净台中就那么两三个菌,随着空气蜗旋,落在瓶子里,就倒霉了,速度快就大大减少污染概率.

3. 特别注意瓶口灭菌. 我们常见的做法是对瓶子放进超净台前用酒精喷一下, 但是瓶口位置要特别多喷一些, 因为接种塞子一拔一塞,最容易把菌带进瓶子里.

4. 超净台一定要空, 因为紫外只能表面杀毒, 装太多东西就容易污染.

5. 枪头要用酒精喷一下, 因为常常会把枪头伸进瓶内接种,就算不接触瓶壁, 也难免表面上粘得菌落到瓶里.