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细胞培养该不该加抗生素?

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engreen 发表于 2016-8-25 17:03:53 | 显示全部楼层 |阅读模式


细胞有没有正常生长,或细胞是否污染,是细胞培养的关键。虽然,顺利的时候,细胞培养起来很简单,可不顺的时候就会出现各种问题-------细胞 污染啦、细胞生长缓慢啦、细胞形态看着不对劲啦、死细胞率多啦。。。。。。。。毕竟,细胞作为一种体外培养的物质,受许多外界因素的影响,培养基、血清、 孵育温度,CO2浓度。。。。。。除此之外,还有一种影响因素就是抗生素。


一般来说细胞培养是不需要加抗生素, 毕竟细胞培养是个无菌技术。如果你的实验室污染严重,建议彻底打扫一下,新洁尔灭擦拭消毒,紫外照射杀菌。然后把你细胞实验涉及到的试剂都做遍肉汤培养! 再就是注意无菌操作,注意其它培养基、胎牛血清、胰酶等别污染了。如果实验室无菌条件优异,那细胞培养是不建议加抗生素的;特别是用于细胞治疗的培养。


没有进行过细胞培养的新手,对无菌技术没有信心的,或者提取的原代细胞,怕污染的,(毕竟实验成功失败对新手来说意义重大)可以适量添加抗生素。


个人认为还是不要加抗生素的好,因为抗生素也有毒性,有些抗生素的药效浓度水平与毒效浓度水平非常接近,对细胞多少有伤害。但如果你们实验室污染严重的话,可以这样添加:

1、最常用的是青霉素、链霉素联合抑制细菌,即所谓的“双抗”,主要针对革兰氏阳性菌、阴性菌;对于细菌的感染也可用庆大或卡那霉素;

2、如果真菌污染严重,可用两性霉素/制霉菌素控制;

3、若为支原体污染,可用庆大霉素/四环素/红霉素;


抗生素多加对细胞无益。加抗生素的主要问题是操作不慎造成的污染未必能及时发现,造成后期较大的损失。


青链霉素是广谱抑菌剂,对革兰氏阴性和阳性细菌有抗菌性,青霉素影响细菌细胞壁合成的终末步骤,在转肽反应步骤一直多肽链的延伸;链霉素与核糖体的30S亚基单位结合,阻断细菌蛋白质的组成。比较常用 。一般用于哺乳动物细胞培养。


一旦细胞污染,最佳处理办法扔掉,查找原因,全面预防。如果细胞是经过大量工作或高价才得到的,扔掉实在可惜,可以针对污染源加抗生素。也可以不加抗生素进行单克隆有限稀释至96孔板,再克隆化。关键是找到污染源,这才是治本的办法;如果原因不明,建议彻底消毒细胞培养箱,重新配置PBS,胰酶、培养基等,就像电脑中毒后重装系统一样。


污染不是靠用抗生素能解决的。关键是要做好细胞房的管理和消毒。


文章来源:英格恩技术的官方博客,原文详见: http://www.engreen.cn/细胞培养该不该加抗生素


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