动物细胞培养中的问题与分析-北京百奥思科生物分享

动物细胞培养是生物学基础实验中的基础，养不好细胞，后续的实验都难以开展。而细胞培养中也时常会有各种状况发生，例如细胞生长缓慢、细胞不贴壁等，那么它们可能的原因都有什么呢？让我们一起了解下吧！

Q

细胞生长缓慢

可能原因：

培养液及培养方法有误；更换不同培养液或血清也可能导致生长缓慢。

培养液中一些细胞生长必须成分如生长因子耗尽或缺乏。

培养物中有少量细菌或真菌污染；

接种细胞起始浓度太低；

细胞老化；

支原体污染。

解决方法

检查培养液和培养方法是否正确，比较新培养液与原培养液成分，让细胞逐渐适应新培养液；

换入新鲜配置培养液，或补加生长因子；

用无抗生素培养液培养，如发现污染，丢弃培养物；

增加接种细胞起始浓度；

换用新的保种细胞；

分离培养物，检测支原体，如发现支原体污染，丢弃培养物。



Q

细胞不贴壁生长

可能原因：

支原体污染。

培养瓶瓶底不干bai净。

培养液pH 值过碱（NaHCO3 分解）。

消化du液或培养液配制错误、过期储存、储存不当。

细胞老化（如传代前细胞已汇合导致失去贴附性）。

接种细胞起始浓度太低或太高。

解决方法：

缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度.

分离培养物,检测支原体.清洁支架和培养箱.如发现支原体污染,丢弃培养物.

注意刷洗,或换用一次性塑料培养瓶.

使用无菌醋酸溶液调整pH 值或充入无菌CO2（将培养液敞口放入培养箱也可）.

重新配置消化液或培养液.

启用新的保种细胞.

调节最佳接种细胞浓度.



Q

培养细胞死亡

可能原因：

培养箱内无CO2；

培养箱内温度波动太大；

细胞冻存或复苏过程中损伤；

培养液渗透压不正确；

培养液中有毒代谢产物堆积。

解决方法：

检测培养箱内CO2；

检查培养箱内温度；

取新的保存细胞种；

检测培养液渗透压；

换入新鲜培养液。
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