[原创]pPICHOLI 穿梭载体系统

pPICHOLI载体可以让异源基因在P. pastoris中表达，同时也能在原核的E.coli中表达。这个载体包含可诱导（酵母）的乙醇脱氢酶（AOX）启动子和E.coli T7启动子，这样就允许它可以在P. pastoris和E.coli中自主复制。因此，载体的线性化就不再是必需的了，而且，少量的DNA就可成功的转化P. pastoris。

由于PARS序列被整合到载体中，使从酵母中提取的质粒非常简单的实现复原。不需要将亚克隆转入一系列表达载体中，也不需对阳性菌株进行检测，而多克隆位点又使DNA片段很方便的连接到载体中。

特点：

1.       原核表达系统是一个易于操作、花费少，并且可得到高水平异源蛋白产物；

2.       P. pastoris/pPICHOLI 系统是一个强有力的真核表达系统，由于结合了AOX或CUP1启动子，使其可以快速生长。

3.       适合表达翻译后修饰的可溶性蛋白和不适宜在大肠杆菌中表达的蛋白（真核）（例如一些毒素蛋白）；

4.       容易克隆和高的转化效率；

5.       方便的亲和纯化和重组蛋白的检测。