激光共聚焦扫描显微镜 LSM510 简介

激光共聚焦扫描显微镜  LSM510
 
 仪器价格   2000000 元  





　
 
 

仪器简介


    激光共聚焦扫描显微镜是利用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对所观察分析的对象进行数字图像处理的一套观察和分析系统。


    LSM510为当今世界上先进型号，整个系统的配置（包括图象输出设备），是目前国内最完整和先进的。


    主要系统组成：激光源、共聚焦显微镜（包括物镜前和探测器前针孔和光学显微镜、探测器计算机以及图象输出设备（显示器、彩色打印机和照片幻灯制作设备）。


    LSM与传统光学显微镜相比，主要解决了生物样品结构相互重叠影响观察的问题，并可形成清晰的三维图象。在检测方面的主要优势有：


    1、对活细胞和组织或细胞切片进行连续扫描，可获得精细的单个或一群细胞或者观察到局部组织的各个层面结构（包括细胞特异结构—细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统，样品的深层结构）的三维图像。


    2、细胞内离子荧光标记，单标记或三奈记，检测细胞内如PH和钠、钙、镁等离子浓度的比率测定及动态变化。


    3、荧光标记探头标记的活细胞或切片标本的活细胞生物物质，膜标记、免疫物质、免疫反应、受体或配体，核酸等观察；可以在同一张样品上进行同时多重物质标记，同时观察；


    4、荧光检测快、激发光强度精确控制、光漂白和荧光淬灭作用小；


    5、对细胞检测无损伤、精确、准确、可靠和优良重复性；数据图象可及时输出或长期储存。


    样品要求：样品制备无特殊要求；各种染色、非染色、荧光标记的组织（包括活组织）、培养细胞、粘附细胞、细胞涂片、石蜡切片、冰冻切片。



应用范围


      1、细胞生物学：细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡；


    2、生物化学：酶、核酸、FISH（荧光原位杂交）、受体分析


    3、药理学：药物对细胞的作用及其动力学；


    4、生理学：膜受体、离子通道、细胞内离子含量、分布、动态；


      5、遗传学和组胚学：细胞生长、分化、成熟变化、细胞的三维结构、染色体分析、基因表达、基因诊断；


      6、神经生物学：神经细胞结构、神经递质的成分、运输和传递、递质受体、离子内外流、 神经组织（如大脑皮质）结构、细胞分布；


    7、微生物学和寄生虫学：细菌、寄生虫形态结构（表面和内部结构）；


      8、病理学及病理学临床应用：活检标本的快速诊断、肿瘤诊断、自身免疫性疾病的诊断，HIV，宫颈上皮细胞涂片诊断；



9、生物学、免疫学、环境医学和营养学；


 

仪器名称：激光扫描共聚焦显微镜

仪器型号：Leica TCS NT

仪器功能：

一、组织光学切片

共聚焦成像系统利用照明点与探测点共轭这一特点，可有效抑制同一焦平面上非测量点的杂散荧光及来自样品中非焦平面的荧光，从而获得普通光镜无法达到的分辨力，同时具有深度识别能力，因而能看到较厚生物标本的细节。它以一个微动马达控制载物台的升降，可以逐层获得高反差、高分辨率、高灵敏度的二维光学横断面图像，从而对活的或固定的细胞及组织进行无损伤的系列光学切片。这一功能又被简称为“细胞CT”。

二、三维图像重建

由共聚焦显微镜的组织光学切片功能采集获得的二维图像数据，经计算机图像处理三维重建软件重组，可得到标本的三维立体结构，揭示亚细胞结构的空间关系，从而能十分灵活直观地进行形态学研究。

三、细胞物理和生物化学测定

激光扫描共聚焦显微镜可进行低光探测、活细胞定量分析和重复性极佳的荧光定量分析，从而能对单细胞或细胞群的溶酶体、线粒体、内质网、细胞骨架、结构性蛋白质、DNA、RNA、酶和受体分子等细胞结构的含量、组分及分布进行定性、定量及定位测定。另外，激光扫描共聚焦显微镜可以对细胞的面积、细胞周长等参数进行自动测定。

四、荧光的定性、定量分析

激光扫描共聚焦显微镜可对单标记或多标记细胞及组织标本进行定量分析，并显示荧光沿Z轴的强度变化；另外，借助于光学切片功能可在毫不损失分辨力的条件下测量标本深度的荧光分布。可以准确监测抗原表达、荧光原位杂交及细胞结合和杀伤的形态学特性并进行定量分析。

五、CA2+、pH及其它细胞内离子的动态测量

利用Fluo-3、Indo-1、Fura-Rad等多种荧光探针，激光扫描共聚焦显微镜可对单个细胞内离子（Ca2+、K+、Na+、Mg2+、pH等）的动态变化做实时定量分析；可以定量探测胞内Ca2+对肿瘤启动因子、化学因子、生长因子及各种激素等刺激的反应；使用双荧光探针Fluo-3和SNAF可同时测定Ca2+和pH值。也就是说利用激光扫描共聚焦显微镜能进行细胞生理信号的动态监测。



样品制备要求：

一、标本

实验标本最好选用培养细胞，要求细胞单层并且很好地贴附在样品池中，细胞周围基质少，便于对细胞断层扫描，重组的三维图像清晰；病理标本一般要制成切片，其处理方法可参阅有关文献，但组织切片不能太厚，避免激发光消耗在标本内。

二、载玻片、盖玻片

载玻片与盖玻片的厚度应尽可能薄，玻面光洁，厚度均匀，无明显自发荧光。

1、      封裱剂

常用缓冲甘油封固。需无自发荧光，无色透明。由于甘油的荧光亮度在pH为8.5～9.5时较亮，不易很快褪去，故常用甘油和0.5MpH为9.0～9.5的碳酸盐缓冲液的等量混合液作封裱剂。

2、      荧光探针的选择
    实验标本要求经过荧光染色后，才能进行激光扫描共聚焦显微镜观察和分析。应根据实验的要求选择合适的荧光探针，探针的选择应具有高灵敏度和高度的特异性。观察多重荧光标记时。应注意荧光的发射带是否重叠。同时还应注意实验标本的自发荧光与所测荧光信号的区分。

请问这种显微镜能不能测脑内磷脂含量?

如果你能用荧光标记脑内磷脂,应该是可以的.

请问区长如何用荧光标记脑内磷脂呢？还有，如何用荧光标记海马突触素，最好具体一点，我准备做这方面的实验。
谢谢！

如果做免疫组化,用带荧光的二抗就可以了.比如CY3,CY5,RHODAMINE.等.一抗还是普通的.

不过没有紫外激发，用途受限

引用：

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原文由 littlebush 发表于 2005-9-6 12:16:11 :

不过没有紫外激发，用途受限

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要另外购买,显微镜下只有相应的滤色片就可以观察,但要拍照得相应的附加设备,而且也不便宜.

0.5MpH为9.0～9.5的碳酸盐缓冲液

如何配置？

How to use FISH（荧光原位杂交)?