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[推荐]酵母双杂交系统

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xgranly 发表于 2008-9-18 15:09:00 | 显示全部楼层 |阅读模式

特点与优点:

1.       鉴定体内蛋白-蛋白相互作用:确定一个挑选的引诱蛋白与一个由cDNA文库表达的蛋白结合区域;

2.       阳性菌落发出绿色荧光,通过一步就可筛选出可能的阳性;

3.       不需要烦琐的β-半乳糖苷酶检测;

4.       通过文库半乳糖诱导性表达筛选存在潜在毒性的蛋白相互作用;

5.       很少的假阳性。

产品介绍:

这个双杂交系统提供了一个高技术和巧妙的方法来研究蛋白相互作用,另外,能表现出蛋白相互作用时的结构域、氨基酸残基和必须的条件,最终可确定新的蛋白,这种筛选能力使其成为基因发现和功能分析的强大工具。

这个系统简化和加快了筛选过程,它将报告蛋白GFPLexA蛋白结合起来构建了酵母双杂交系统。

蛋白的相互作用,导致了两个报告基因(LEU2营养筛选基因和GFP基因)的表达,LEU2的表达,使酵母可以在缺少亮氨酸的培养基上生长,而GFP基因的表达,则可使酵母在紫外光下发出绿色荧光。

使用绿色荧光蛋白GFP作为报告元件避免了费时的β-半乳糖苷酶检测,特殊的GFP变异体由pGNG1质粒表达的,它比野生型GFP发出的荧光要强18倍,两种蛋白相互作用的酵母菌落发出的绿色荧光可以很容易的被检测出来。

  PSKAN    pSKAN Phagemid Display System

PS1255   18mer-sequencing primer 1255 500 pmole

 

PS2897   19mer-sequencing primer 2897 500 pmole

 

PSKAN3   pIII antibody (monoclonal mouse IgG1) 100 μl

 

PSKAN2   anti-hPSTI antibody (monoclonal mouse IgG1) 100 μl

 

PSKAN8   pSKAN8 vector DNA, lyophilized 5 μg

 

PSKAN4   pMAMPF3-PSTI4 vector DNA, lyophilized 5 μg

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