代做实验，慢病毒与RNAi等实验技术服务（威斯腾生物技术服务）

中国生命科学实验技术服务联盟
威斯腾生物技术服务中心（重庆）
承接RT-PCR，荧光定量PCR，EMSA, WesternBlot，RNAi，慢病毒载体构建，原位末端凋亡，免疫共沉淀，基因合成测序，单克隆抗体制备等一系列实验技术服务，欢迎来电讯洽。
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1、慢病毒的简介：
Lentivirus是逆转录病毒的一种，具有逆转录病毒的基本结构和特性；能整合入宿主细胞基因组，长期表达，可用于转基因动物制备；但也有不同于逆转录病毒的组分和特性；比逆转录病毒具有更高的滴度，不仅可以感染分裂细胞，更重要的是还能感染非分裂的细胞。
　　利用Lentivirus构建的shRNA表达载体，与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的shRNA相比，一方面可以替代后者，另一方面，Lentivirus-shRNA载体经包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞（如原代细胞、悬浮细胞等），并且在感染后可以整合到受感细胞的基因组，进行长时间的稳定表达，是制备稳定表达shRNA细胞株和进行体内实验(in vivo)的最有效手段。
　　目前我们能够为客户提供从载体构建到慢病毒包装纯化和检测的一站式服务； 同时公司还在高效慢病毒生产技术的基础上建立并完善了慢病毒载体制备转基因动物的实验技术。
2、慢病毒载体构建包装实验流程如下：

1.
根据目的基因相关信息（序列，基因序列号等），构建含有外源基因或序列的重组载体；

2.
对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量（不含内毒素）的重组质粒；

3.
使用高效重组载体和慢病毒包装质粒共转染293T 细胞，进行病毒包装并收集上清液；

4.
通过超滤和超速离心浓缩和纯化病毒；

5.
用病毒液感染293T细胞，测定病毒滴度；

用高质量的病毒液感染靶细胞，通过定量PCR或者Westenblot检测目的基因表达，也可以进一步进行稳定细胞株的筛选用于长期的功能学研究。

3、目的基因的慢病毒构建包装纯化

RNAi与慢病毒载体技术服务：
基于载体的microRNA载体构建：
基于载体的shRNA载体构建