抑制剂DAPT 的生物活性研究

DAPT (GSI-IX)是一种新型γ-分泌酶抑制剂，抑制HEK 293细胞中全部Aβ产量， IC50为20 nM。
信号通路图：

        体外研究：        DAPT功能性抑制γ-分泌酶而降低HEK 293细胞中全部Aβ产量，IC50为20 nM。DAPT作用于原代培养的人神经细胞，也抑制Aβ产量，作用于全部Aβ和Aβ42时, IC50分别为115 nM和200 nM，比作用于HEK 293细胞时低5-10倍。最新研究显示DAPT 抑制SK-MES-1 细胞增殖，这种作用存在浓度依赖性，IC50为11.265 μM。此外, DAPT作用于肺鳞状细胞癌细胞，通过抑制Notch受体信号通路，也诱导依赖型和非依赖型细胞凋亡。
体内研究：        DAPT按100mg/kg剂量处理PDAPP小鼠，产生强劲和持久的药效，1小时内脑中 DAPT水平超过100 ng/g ，且处理后，持续上升达18小时，3小时后的时候观察到最高水平为490 ng/g。在此期间, DAPT 按100 mg/kg剂量处理，也降低大脑皮层全部Aβ和Aβ42，这种作用存在剂量依赖性，降低50%。 DAPT按40 mg/kg剂量作用于大鼠大脑皮层, 抑制LPS诱导的γ分泌酶活性，且提高携带长期神经炎症的细胞凋亡。
        细胞系：        SK-MES-1
        浓度：        2.5 μM到 160 μM
        处理时间：        72小时
        方法：        细胞接种在96孔板上，使用0.1% DMSO或 DAPT（浓度为2.5 μM-160 μM ）处理72小时。使用MTT染料减少检测实验，稍微修正，测定细胞毒性。与DAPT温育后, 20 μL MTT溶液 (5 mg/mL，溶于 PBS)加到含 180 μL培养基的每孔中，实验板在37 oC下温育4小时，随后每孔加入150 μL DMSO，在室温下震荡15分钟混合。通过酶联免疫吸附法在490 nm处测定吸光值。使用α-MEM 及等量的MTT 溶液和溶剂，作为空白对照。使用PROBIT 程序在SPSS中计算IC50值。
        原文转自新浪博客：抑制剂DAPT 的生物活性研究