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请教: 关于非兴奋性细胞的膜片钳技术

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fxf102 发表于 2005-11-3 20:12:00 | 显示全部楼层 |阅读模式

分泌细胞一般分为兴奋性细胞和非兴奋性细胞

偶现在做的是非兴奋性细胞glia,不知道有没有人做??

现在的情况是由于是培养的细胞,长在小片上,所以细胞特别平,不容易形成高阻抗密封,有的细胞形成密封后特别不容易拉破,偶做的是whole cell ,一拉密封就被破坏了??到底是怎么回事啊??有没有做这种细胞或相近细胞的!大家探讨一下??交流交流!偶QQ4758567,在后面跟帖也行啊!小弟新来的 !还望多照顾!

bioguider 发表于 2005-11-3 21:17:00 | 显示全部楼层

glia的PATCH是比较难些,你可以选择那些细胞有点鼓的,比较好做些.

有的细胞形成密封后特别不容易拉破,偶做的是whole cell ,一拉密封就被破坏了??

这句话是什么意思?

是指吸破么?如果要吸破,得轻点,否则容易掉.

fanping 发表于 2005-11-4 14:23:00 | 显示全部楼层

负压要缓慢,轻柔,我一般给0.5mL

 楼主| fxf102 发表于 2005-11-7 11:56:00 | 显示全部楼层

是啊!在形成G欧阻抗后我用10ml的注射器吸的!不太好控制,所以很容易破坏那个密封!电阻一下就降下来了!可以有别的方法来把细胞弄破么??我看到有的用 ZAP,能行么??我测膜电容的!

fanping 发表于 2005-11-12 14:42:00 | 显示全部楼层
引用
原文由 fxf102 发表于 2005-11-7 11:56:46 :

是啊!在形成G欧阻抗后我用10ml的注射器吸的!不太好控制,所以很容易破坏那个密封!电阻一下就降下来了!可以有别的方法来把细胞弄破么??我看到有的用 ZAP,能行么??我测膜电容的!


用1ml的注射器吸,即好控制又容易吸破,或者直接用mouth吸,呵呵
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