请教生化与细胞所考试题，请那位大虾点拨一二

请教考试题，请那位大虾点拨一二

1． 发现一个多次跨膜蛋白，为确定跨膜次数及末端朝向，在细胞内高表达该蛋白，用免疫荧光术标记细胞。用抗N端抗体标记活细胞时，出现膜上荧光，用抗C端抗体时却没有。用甲醛固定细胞（此时细胞膜被破坏）后，则膜两种抗体都出现膜上荧光标记。将细胞膜分离纯化，然后用蛋白酶充分降解膜外部分，再经SDS-PAGE和银染，发现有10条主带，其中3条在对照细胞（即仅转染了空质粒载体的细胞）的相应样品中也有。如果先用蛋白酶处理，再分离细胞膜，会发现6条主带，而对照样品中有其中2条。从这些结果能得出什末结论？在此之后你打算开展那些方面的研究？

2． 孕酮可促使爪蟾卵母细胞（oocyte）成熟为卵（egg）。如果用蛋白合成抑制剂放线酮处理，则可阻断该过程，说明需要蛋白质的合成。Oocyte中注入50nl egg的胞浆 也可使其成熟为正常的卵，但若注入oocyte的胞浆则无作用。由此可知egg的胞浆内含有MPF，而且MPF导致的oocyte成熟不受放线酮的影响。如果将oocyte用孕酮处理不同时间，然后放入放线酮中，可以发现在特定时间后oocyte就不再对该药物敏感，而能够成熟为正常卵。这个时间与MPF活力的出现 相对应。为了解MPF的合成是否是oocyte对放线酮敏感的原因，某人将50nl的egg胞浆注入一个oocyte中，待其成熟为卵后，从中抽出50nl胞浆注入另一个oocyte中，如此进行10次之多，他发现，每次胞浆转移都能使oocyte成熟为卵，而且卵中MPF的活力与第一个卵一样高。而且，即使把待注射的oocyte放在放线酮中，结果也一样。1）如果每只oocyte的体积为1ul，经10次转移后，最初50nl egg 胞浆被稀释了多少倍？你认为MPF经这样的稀释还能保持活力不变吗？ 2）解释为什末在上述转移试验中MPF活力总能保持相同水平？3）试推测在 孕酮催熟过程中需要合成的蛋白质因子的功能？

3． 试管内偶联线粒体加琥珀酸与ADP产生状态3呼吸耗氧时，在分光光度计下检测到线粒体内源NAD+还原。这有那几种可能的机制？最后证明是何种机制？

1st is a seven transmembrane receptor that is G-protein coulped Receptor